超声介导微泡空化效应对鼠肺微血管内皮细胞膜流动性及细胞骨架的影响

摘要

目的探讨超声介导微泡空化效应对鼠肺微血管内皮细胞膜流动性及细胞骨架的影响。方法6孔板培养鼠肺微血管内皮细胞,每孔加入20μg质粒EGFP及10%微泡后行超声辐照,辐照方式为连续波,探头频率2MHz,分别以不同照射时间分组:A组30s,B组60s,C组90s,D组120s,E组180s（机械指数均为1.0）;对B组再以不同机械指数分组:B1组0.75,B2组1.0,B3组1.3,B4组1.5,B5组1.8（照射时间均为60s）。以激光共聚焦显微镜观察细胞膜荧光恢复评价细胞膜流动性,以免疫荧光法观察细胞微管蛋白、微丝蛋白荧光强度变化。结果胞膜流动性荧光恢复指数分别为:A组0.173±0.013,B组0.250±0.037,C组0.364±0.022,D组0.381±0.019,E组0.395±0.009（B～E组与A组比较,均P＜0.01）;B1组0.171±0.017,B2组0.255±0.026,B3组0.378±0.007,B4组0.382±0.009、B5组0.397±0.008（B2～B5组与B1组比较,均P＜0.01）。微管蛋白荧光强度分别为:A组159.15±4.79,B组188.23±6.20),C组205.80±4.48,D组208.99±8.34,E组213.70±5.09（B～E组与A组比较,均P＜0.01）;B1组176.84±3.10,B2组187.57±14.52,B3组206.41±11.66,B4组220.12±13.39,B5组221.16±12.78（B2～B5组与B1组比较,均P＜0.01）;C、D、E组间两两比较及B3、B4、B5组间两两比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。不同辐照时间及MI时,微丝蛋白荧光强度差异无统计学意义。结论超声介导微泡空化在一定能量模式下可引起细胞膜流动性及微管蛋白荧光改变,此效应可能是超声及微泡促基因转染机制之一。