超声微泡造影剂促腺病毒介导MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的作用机制及安全性研究

摘要

目的探讨超声微泡造影剂促进以腺病毒为载体介导的多药耐药基因1（MDR1）体外转染兔骨髓单个核细胞的作用机制和安全性。方法根据是否加入超声微泡造影剂和进行超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组（A）、腺病毒转染组（B）、腺病毒转染+超声辐照组（C）、腺病毒微泡造影剂转染组（D）和腺病毒微泡造影剂转染+超声辐照组（E）。不同实验因素处理后,采用流式细胞仪检测各组细胞外源性MDR1基因的转染率,同时观测转染后不同时间各组细胞体外扩增情况;台盼蓝拒染法计数各组细胞的存活率;分别用扫描电镜和透射电镜观察超声辐照后细胞超微结构的改变。结果流式细胞仪检测各组细胞MDR1基因的转染率分别为0.39%±0.11%、5.03%±0.35%、4.93%±0.38%、5.25%±0.80%、19.93%±1.51%,E组明显高于其余4组（P＜0.05）;试验各组细胞在转染后不同时期体外增殖情况差异无统计学意义（P＞0.05）,各组细胞存活率差异亦无统计学意义（P＞0.05）;一定强度的超声辐照后,骨髓单个核细胞胞膜出现一过性的小孔,细胞器发生可逆性肿胀改变。结论超声微泡造影剂可使兔骨髓单个核细胞通透性暂时性提高,促进腺病毒载体介导的MDR1基因转染;同时不会对细胞的增殖能力、存活率及超微结构造成严重的不可逆损害,证明其是一种安全可行的基因转移新方法。