纳米微泡介导GFP转染小鼠骨骼肌细胞的实验研究

摘要

目的 探讨两种纳米微泡（白蛋白外膜和磷脂外膜）增强基因转染小鼠骨骼肌的作用。方法以正常C57B10小鼠胫前肌为研究对象,目的 基因GFP与微泡混合注入小鼠胫前肌,一侧胫前肌经超声（1MHz脉冲波,脉冲重复频率为100 Hz,20%工作周期,空间峰值时间峰值声强为2 W/cm~2,辐照作用时间30 s）,另一侧胫前肌不经超声辐照。观察白蛋白纳米微泡及磷脂纳米微泡增强骨骼肌细胞GFP转染水平的作用。1周后处死小鼠,荧光显微镜观察发出绿色荧光者为GFP阳性肌纤维细胞,计数最大GFP阳性肌纤维细胞数,作为GFP基因转染效率指标。结果①白蛋白纳米微泡组和白蛋白纳米微泡+超声组最大GFP阳性肌纤维数显著高于阴性对照组（P＜0.05）,显著低于阳性对照组（P＜0.05）。②磷脂纳米微泡组与阴性对照组及阳性对照组比较,最大GFP阳性肌纤维数差异均无统计学意义（P＞0.05）。磷脂纳米微泡+超声组最大GFP阳性肌纤维数较阴性对照组显著增高（P＜0.05）;磷脂纳米微泡+超声组与阳性对照组最大GFP阳性肌纤维数差异无统计学意义（P＞0.05）。结论纳米微泡可增强基因转染骨骼肌细胞效率,白蛋白含氟化气体纳米微泡具有发展潜力。