内生多肽Elafin对气道黏蛋白5AC表达的影响

摘要

目的探讨内生多肽Elafin调节气道黏液高分泌的分子机制。方法构建人Elafin重组质粒,原代培养正常人支气管上皮细胞HBE16,分为对照组、香烟抽提物（CSE）刺激组、CSE刺激+转染重组质粒、CSE刺激+空质粒组、单纯转染重组质粒以及空质粒组6组。四甲基偶氮唑盐法检测各组细胞活力,Western blot法检测p-JNK、p-ERK、p-P38和IkBα蛋白含量,荧光素酶报告基因系统测定激活蛋白-1（AP-1）及核转录因子-kB（NF-kB）活性,RT-PCR检测各组黏蛋白（MUC）5AC mRNA表达水平,ELISA法分析各组细胞MUC5AC蛋白的相对含量。结果 CSE刺激组的p-JNK、p-ERK、p-c-Jun、IkBα、AP-1、NF-kB、MUC5AC和MUC5AC mRNA含量分别为（0.55±0.03）μg/mg、（0.64±0.06）μg/mg、（0.60±0.07）μg/mg、（0.27±0.03）μg/mg、7.49±0.31、4.42±0.22、（0.71±0.04）mg/L和0.81±0.04,与对照组的（0.26±0.02）μg/mg、（0.30±0.05）μg/mg、（0.19±0.04）μg/mg、（0.61±0.04）μg/mg、2.54±0.22、2.37±0.16、（0.23±0.02）mg/L和0.32±0.03比较差异有统计学意义（均P＜0.05）。转染重组Elafin后再给予CSE刺激,p-JNK、p-ERK、p-c-Jun、IkBα、AP-1、NF-KB、MUC5AC和MUC5AC mRNA含量分别为（0.38±0.04）μg/mg、（0.31±0.04）μg/mg、（0.14±0.03）μg/mg、（0.54±0.03）μg/mg、2.60±0.19、2.55±0.21、（0.28±0.03）mg/L、0.35±0.05,与CSE组相比差异有统计学意义（均P＜0.05）;p-P38蛋白含量在CSE刺激及转染Elafin前后无明显变化。结论内生多肽Elafin可降低JNK和ERK磷酸化水平并抑制IkBα蛋白降解,从而降低转录激活蛋白-1和核因子-kB的活性,下调黏蛋白5AC的高表达,而p38MAPK在其中的作用并不明显。