创伤性脑损伤后大鼠海马区神经干细胞增殖及其与Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3信号通路活性的关系

摘要

目的 探讨创伤性脑损伤（TBI）后大鼠海马区神经干细胞（NSCs）增殖能力及其与Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3（JAK2/STAT3）信号通路活性的关系。方法 108只SD大鼠按随机数字表法分为对照组（36只）和TBI组（72只）。利用PinPoint ?精密皮质撞击器构建TBI模型。伤后1,3,7,14,21和28 d,取大鼠脑组织进行免疫荧光染色以检测海马区NSCs[5－溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）＋/干细胞关键蛋白－2（Sox2）＋]增殖情况；采用Western blot法检测磷酸化JAK2（p－JAK2）和磷酸化STAT3（p－STAT3）的表达水平,并分析二者的变化趋势。在初步分析伤后海马区NSCs增殖能力和JAK2/STAT3信号通路活性变化趋势的基础上,另取24只SD大鼠,按随机数字表法分为TBI＋生理盐水组和TBI＋AG490（JAK2特异性抑制剂）组,每组12只。伤后7 d,采用免疫荧光染色检测海马区NSCs增殖能力；采用Western blot法检测p－JAK2和p－STAT3的表达水平,从而进一步确认TBI后海马区NSCs的增殖能力与JAK2/STAT3信号通路的相关性。结果 与对照组比较,TBI组海马区NSCs细胞数量和p－JAK2、p－STAT3的表达量增多,且在伤后7 d最显著（NSCs数量：对照组为31.2±4.7,TBI组为111.4±8.1；p－JAK2：对照组为1.11±0.09,TBI组为2.16±1.01；p－STAT3：对照组为1.05±0.06,TBI组为2.06±0.09）（P均＆0.01）。TBI组海马区NSCs增殖能力与p－JAK2、p－STAT3表达量的变化趋势一致。伤后7 d,TBI＋AG490组p－JAK2和p－STAT3的表达量及NSCs的增殖能力明显下降（p－JAK2：TBI＋生理盐水组为2.18±0.15,TBI＋AG490组为1.24±0.10；p－STAT3：TBI＋生理盐水组为2.21±0.12,TBI＋AG490组为1.25±0.11；NSCs：TBI＋生理盐水组为112.8±8.6,TBI＋AG490组为75.5±6.4）（P均＆0.01）。结论 TBI后大鼠海马区NSCs的增殖能力提高,JAK2/STAT3信号通路活性也增强,且两者有相同的变化趋势。JAK2抑制剂AG490可以降低JAK2/STAT3信号通路活性和NSCs的增殖能力。该结果可为促进TBI后神经再生与功能修复的相关研究提供参考。