祁连圆柏对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用及其有效部位筛选

摘要

目的:探讨祁连圆柏对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用并进行有效部位的筛选.方法:选用硅胶柱层析法,提取有效的抗瘤组分.采用台盼蓝拒染法及MTT显色法,检测不同浓度祁连圆柏提取物作用不同时间后对HL-60细胞增殖的影响,光镜结合电镜观察凋亡细胞的形态特点,流式细胞术(FCM)检测其诱导细胞凋亡的细胞周期阻滞点,免疫组化SP法对细胞周期蛋白P27及P16的表达水平进行检测.结果:祁连圆柏各提取物对HL-60细胞增殖有明显的抑制作用,C液作用最明显,C液-3组分作用显著.光镜与电镜下均见凋亡细胞明显增多.流式细胞术检测G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,细胞的半数抑制浓度(IC50)为3.07μg/ml.实验组细胞周期蛋白P27及P16表达水平明显升高.结论:祁连圆柏对白血病HL-60增殖有明显的抑制作用,其中醇提乙酸萃取物组分-3作用最为显著,其作用机制与诱导细胞凋亡,改变细胞周期,上调P27、P16蛋白水平有关.