miR-26b调控脂肪酸结合蛋白4介导脂肪细胞分化的分子机制

摘要

背景:一些研究已经证实了miR-26b、PTEN-PI3K-AKT通路及脂肪酸结合蛋白4在脂肪细胞分化过程中的作用,但其是否存在相互作用以及分子机制尚未见报道.目的:探讨miR-26b通过PTEN-PI3K-AKT通路调控脂肪酸结合蛋白4介导脂肪细胞分化的分子机制.方法:取3T3-L1前脂肪细胞为对照组,分化成熟的3T3-L1细胞为分化组,转染miR-26b inhibitor的3T3-L1细胞为转染组,转染miR-26b inhibitor的3T3-L1细胞再诱导分化成熟为转染分化组.分化组和转染分化组细胞进行油红O染色观察成熟脂肪细胞内脂滴形成情况.荧光定量PCR方法检测4组细胞内miR-26b以及脂肪酸结合蛋白4、PTEN、PI3K、AKT mRNA表达,Western blot方法检测4组细胞内脂肪酸结合蛋白4、PTEN、PI3K、AKT蛋白表达.结果 与结论:①miR-26b在3T3-L1细胞分化后表达量明显升高(P<0.05),提示其可能参与细胞分化的调节;抑制细胞内miR-26b水平,可以抑制3T3-L1细胞向脂肪细胞分化,减少细胞内脂滴积累;②3T3-L1细胞分化后细胞内PI3K、AKT、脂肪酸结合蛋白4 mRNA及蛋白表达明显增加(P均<0.01),PTEN mRNA表达增加(P<0.05),但蛋白水平无明显变化(P>0.05),提示3T3-L1细胞分化过程中PI3K-AKT通路激活,脂肪酸结合蛋白4水平升高;③下调细胞内miR-26b水平的分化后细胞较正常分化细胞脂肪酸结合蛋白4、PI3K、AKT mRNA及蛋白表达量减少(P均<0.01),PTEN mRNA及蛋白表达量增高(P均<0.05),提示抑制miR-26b明显促进PTEN mRNA及蛋白表达,从而抑制PI3K-AKT通路,降低脂肪酸结合蛋白4 mRNA及蛋白表达,抑制3T3-L1细胞分化.