间断气体压力对体外培养成人骨髓基质细胞增殖分化的影响

摘要

目的:取成人的骨髓液分离纯化得骨髓基质细胞进行体外培养,并对细胞施加间断气体压力,观察细胞在加压后的增殖及分化情况。方法:实验于2001-11/2004-04在广西医科大学实验中心完成。取无骨髓疾病患者骨髓经分离纯化后得骨髓基质细胞,接种于孔板内,在原代培养72h时将培养板以封口膜封闭后置于压力装置内,每天施加压力(0.098MPa)8h,按照加压15min→放压15min→加压15min顺序连续9d。另设对照组不加压力,其余培养条件与加压组相同。分别在加压的第3,6,9天进行细胞计数和碱性磷酸酶含量检测。结果:①施加间断压力的骨髓基质细胞和对照组相比其增殖、分化速度快,经统计学分析该差别有统计学意义[第3天:(12.30±1.16)～(12.90±1.10)个/视野,(10.30±1.06)～(11.00±1.05)个/视野;第6天:(14.80±1.75)～(15.90±0.99)个/视野,(12.30±0.95)～(13.40±1.26)个/视野;第9天:(16.20±1.48)～(17.20±1.62)个/视野,(12.80±0.79)～(14.10±0.99)个/视野,P<0.05]。随着加压时间延长,两组增殖、分化速度无明显差别。②培养至第3,6,9天,实验组较对照组具有较强的碱性磷酸酶活性(A)[第3天:0.589±0.084～0.722±0.076,0.511±0.116～0.655±0.072;第6天:0.781±0.107～0.829±0.054,0.648±0.123～0.747±0.077;第9天:0.870±0.096～0.902±0.132,0.645±0.107～0.812±0.188,P<0.05]。结论:合理的体外培养和适当的生物外力可以促进离体培养的成人骨髓基质细胞的增殖和分化。