促红细胞生成素与鼠骨骼肌卫星细胞的增殖及分化

摘要

背景：骨骼肌卫星细胞心肌移植过程中，一些重要环节仍无法很好的解决，其中就包括骨骼肌卫星细胞移植后的死亡问题。促红细胞生成素从生产到临床使用技术都很成熟，具有抗凋亡和减轻炎症反应的作用。目的：探讨促红细胞生成素对鼠骨骼肌卫星细胞增殖分化的影响，从而为二者联合进行心肌移植的设想提供一些支持依据。设计、时间及地点：细胞生物学行为体外实验，于2006—07／2007-10在暨南大学医学院中心实验室和深圳市人民医院中心实验室完成。材料：清洁级1～3d龄SD乳鼠6只，促红细胞生成素为沈阳三生制药公司产品。方法：改良酶消化法分离培养鼠骨骼肌卫星细胞，传至第3代分别加入含0，10，20，40u／mL促红细胞生成素的DMEM培养基。主要观察指标：倒置显微镜下观察骨骼肌卫星细胞分化能力，MTT法检测细胞活力，流式细胞仪分析细胞周期。结果：未加入促红细胞生成素组培养5d，局部相邻的骨骼肌卫星细胞可以互相融合成长条状的肌管，随时间延长肌管数量逐渐增多，且能看见肌管跳动；10，20，40u／mL促红细胞生成素组均未见肌管形成，骨骼肌卫星细胞大量堆积在一起。与未加入促红细胞生成素组比较，作用48h，72h时各浓度促红细胞生成素组骨骼肌卫星细胞活力均明显升高（P〈0．05）。随促红细胞生成素浓度的升高，G。期细胞所占百分率逐渐降低，而S＋G2/M期细胞所占百分率逐渐升高。结论：促红细胞生成素呈剂量依赖性提高骨骼肌卫星细胞活力、促进骨骼肌卫星细胞增殖，并抑制其向肌管分化。