钥孔戚血蓝蛋白诱导Balb/C小鼠脾细胞Th1/Th2失衡(英文)

摘要

背景:建立具有一定特征的、稳定的、可重复性强的Th1/Th2失衡动物模型是研究Th1/Th2失衡机制的重要基础。目的:分析钥孔戚血蓝蛋白诱导Balb/C小鼠脾细胞Th1/Th2失衡的特点。设计:随机对照探索性实验。单位:河北医科大学基础医学院河北省法医学实验室。材料:实验于2005-09/2007-02在河北医科大学基础医学院河北省法医学实验室完成。实验选用Balb/c小鼠,对动物处置方法符合动物伦理学要求。方法:①以钥孔戚血蓝蛋白+完全弗氏佐剂免疫Balb/C小鼠,分离脾细胞,细胞因子分泌高峰点测定实验分为3组,分别为钥孔戚血蓝蛋白6.25,12.5,25mg/kg组;不同免疫剂量和免疫次数实验分为7组,分别为钥孔戚血蓝蛋白6.25,12.5,25mg/kg组,6.25,12.5,25mg/kg二次免疫组及对照组。主要观察指标:以酶联免疫吸附法检测小鼠脾细胞培养上清中Th1型细胞因子γ-干扰素、白细胞介素2、白细胞介素12p40及Th2型细胞因子白细胞介素4、白细胞介素5的分泌量及血清中Th1型抗体IgG2a和Th2型抗体IgG1水平。结果:①钥孔戚血蓝蛋白免疫使小鼠出现脾肿大,脾细胞计数增高。②体外同种抗原再刺激使免疫小鼠脾细胞培养上清中4种细胞因子浓度增高,其中白细胞介素2分泌量于24h即明显增高,48h达高峰;白细胞介素4、γ-干扰素和白细胞介素5在24h轻度增高,以后逐渐上升,96h达高峰。各时间点培养上清中白细胞介素12p40含量均较低,与对照组无明显差异。③不同剂量单次或二次免疫均可致4种细胞因子不同程度增高,白细胞介素4/γ-干扰素比值增高,其中12.5mg/kg钥孔戚血蓝蛋白二次免疫组细胞因子分泌量明显高于其他各组(P<0.01)。④钥孔戚血蓝蛋白免疫小鼠血清IgG1,IgG2a水平发生不同程度增高,其中IgG1增高更为明显。结论:钥孔戚血蓝蛋白加完全弗氏佐剂可诱导Balb/C小鼠脾细胞发生Th2型优势反应。