FAT10基因沉默对人食管癌细胞凋亡及肿瘤干细胞特性的影响

摘要

背景：人类白细胞抗原F介导转录因子10（human leukocyte antigen F-associated transcript 10，FAT10）在结肠癌等很多种肿瘤细胞中会发生高表达，但其与食管癌的关系报道较少。 目的：观察siRNA干扰技术沉默类泛素蛋白（FAT10）基因表达对人食管癌细胞EC9706细胞的侵袭、凋亡及及肿瘤干细胞特性的影响。 方法：根据FAT10 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列，瞬时转染EC9706细胞。将人食管癌细胞EC9706细胞分为3组，设FAT10 siRNA组，阴性对照组、空白对照组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FAT10及bcl-2的表达；CCK-8法测定细胞体外增殖能力；流式细胞技术观察细胞凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44＋CD133＋的表达；TUNEL染色检测各组细胞的的凋亡、细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力。 结果与结论：①RT-PCR和Western blot显示，FAT10 siRNA组较阴性对照组和空白对照组FAT10及bcl-2 mRNA和蛋白表达都明显下降（P＜0.05）；②肿瘤干细胞标志物CD44＋CD133＋的表达比例显著降低（P＜0.05）；③与阴性对照组和空白对照组相比，FAT10 siRNA组细胞的凋亡率明显升高（P＜0.01），增殖、侵袭力显著下降（P＜0.05）。④结果表明，特异性沉默FAT10基因表达能够降低食管癌细胞的侵袭力，抑制细胞的增殖，促进bcl-2表达降低，使其凋亡显著增加，使具有CD44＋CD133＋肿瘤干细胞特性的细胞比例降低。