丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料的制备与细胞相容性

摘要

背景：研究发现载细胞的组织工程骨植入体内后面临严峻的“血管再生”难题;前期研究发现丹参素可改善血管内皮祖细胞功能,发挥血管保护作用。目的：制备丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料,观察其细胞相容性。方法：采用负压吸附法构建载药剂量分别为10-7,10-6,10-5 mol的丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料,采用扫描电镜观察材料表面丹参素涂层分布,采用红外光谱分析材料内部成分。分别以β-磷酸三钙支架材料浸提液与不同载药量丹参素涂层β-磷酸三钙支架材料浸提液培养人血管内皮祖细胞,培养2,4,6,8,10 d,检测细胞增殖;培养1,7,14 d,检测细胞上清液中NO和血管内皮生长因子水平;培养14 d,观察细胞在血管基质胶上的管腔形成。将人血管内皮祖细胞接种于β-磷酸三钙支架与不同载药量丹参素涂层β-磷酸三钙支架上,培养7 d,扫描电镜观察细胞生长。结果与结论：（1）丹参素涂层均匀一致地平铺于材料孔隙内表面,随载药剂量增加,丹参素涂层的结晶结构呈现出更加致密状态;（2）丹参素涂层β-磷酸三钙支架中丹参素和磷酸三钙的红外光谱特征吸收峰位置均未发生变化;（3）丹参素涂层β-磷酸三钙支架对人血管内皮祖细胞具有促增殖作用,以10-6,10-5 mol丹参素涂层β-磷酸三钙支架为有效;（4）与β-磷酸三钙比较,10-6,10-5 mol丹参素涂层β-磷酸三钙支架可在第14天显著提高细胞上清液中NO水平（P〈0.05）,在第7,14 d显著提高细胞上清液中血管内皮生长因子水平（P〈0.05）;（5）不同载药量丹参素涂层β-磷酸三钙支架组浸提液培养细胞均有形成管腔结构趋势,以10-5 mol丹参素涂层β-磷酸三钙支架组形成的管腔结构最为成熟;（6）结果表明,丹参素涂层β-磷酸三钙支架可促进人血管内皮祖细胞增殖及向成熟内皮细胞分化,具有良好的细胞相容性。