静压力作用下三维培养人牙周膜干细胞促进RAW264.7细胞的破骨向分化

摘要

背景:牙周膜干细胞作为种子细胞,其成骨潜能成为研究热点,而牙周膜干细胞对破骨细胞活动的调控研究较少,有待进一步探索。目的:研究持续静压力作用下三维培养人牙周膜干细胞对RAW264.7细胞破骨向分化的影响。方法:取第3,4代人牙周膜干细胞进行三维培养,随机分为13组,采用FLEXCELL5000C加压仪器,分别施加5 kPa(2,6,12 h),25 kPa(2,6,12 h),45 kPa(2,6,12 h),65 kPa(2,6,12 h)的持续静压力,第13组不加压。将细胞上清作为条件培养基按照一定比例作用于RAW264.7细胞,5 d后抗酒石酸酸性磷酸酶染色及qPCR检测破骨相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶9的表达。结果与结论:(1)三维培养下加压实验组与不加压对照组支架形态稳定,细胞状态良好;(2)压力加载组人牙周膜干细胞条件培养基促进RAW264.7细胞的破骨分化;(3)在一定范围内,促破骨作用与力值加载条件呈正相关,45 kPa,12h组促RAW264.7细胞破骨分化作用最强;65 kPa,12 h组的促破骨能力减弱;(4)结果表明,静压力作用下三维培养的牙周膜干细胞通过旁分泌途径促进RAW264.7的破骨分化,力值加载条件与促破骨作用具有相关性。