去甲斑蝥素对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抗癌作用机制

摘要

目的探讨去甲斑蝥素（NCTD）对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抗癌作用机制。方法在建立裸鼠胆囊癌移植瘤动物模型的基础上进行肿瘤增殖、侵袭、转移体内干预实验,实验分空白对照、氟尿嘧啶、NCTD、NCTD+氟尿嘧啶4组。6周末应用链霉素亲和生物素复合物（SABC）法检测移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki67、细胞周期素D1（cyclinD1）、p27、Bcl2蛋白,逆转录PCR（RT PCR）检测PCNA、cyclinD1、p27、Bcl2、Bax、存活素（Survivin）基因mRNA。HE染色观察瘤周癌细胞浸润、侵袭,解剖显微镜下观察肺组织转移瘤结节,并采用SABC和RT PCR检测nm23、金属蛋白酶2（MMP2）及其组织抑制剂（TIMP2）蛋白和mRNA。结果NCTD组增殖相关PCNA、Ki67、cyclinD1蛋白表达下降,p27蛋白表达上升;PCNAmRNA、cyclinD1mRNA表达下降,p27mRNA表达增高。NCTD组凋亡相关Bcl2蛋白表达下降;Bcl2mRNA、SurvivinmRNA表达下降,BaxmRNA表达增高。NCTD显著减少荷瘤鼠移植瘤的瘤周癌细胞浸润和肺转移结节（P＜0.01）;NCTD组转移相关MMP2蛋白表达下降,nm23、TIMP2蛋白表达上升;nm23H1mRNA、TIMP2mRNA表达增高。结论NCTD抑制荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤增殖、侵袭和转移的机制可能与NCTD干扰胆囊癌移植瘤细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻止细胞迁移运动,以及影响细胞增殖、细胞周期调控、细胞凋亡、细胞基质溶解和转移相关基因蛋白表达有关。