细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响

摘要

目的研究细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达中的作用,为进一步探索骨组织力传导机制提供依据。方法原代培养BALB/c小鼠成骨细胞,将原代培养的成骨细胞分为对照组和细胞松弛素D组,细胞松弛素D组使用细胞松弛素D破坏细胞骨架。每组一半细胞加载1.2 Pa的流体剪切力,另一半不加载。分别用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）和免疫荧光检测c-fos基因mRNA和蛋白、细胞骨架蛋白的表达水平,并对结果进行双因素方差分析和成组t检验。结果无论是对照组还是细胞松弛素D组,流体剪切力加载均可使成骨细胞c-fos基因mRNA相对水平（分别为0.1637±0.0303和0.0104±0.0070）和蛋白荧光强度（分别为177.14±9.37和150.95±6.17）升高,与未加载流体剪切力的对照组和细胞松弛素D组细胞（mRNA相对水平分别为0.0057±0.0021和0.0032±0.0014,蛋白荧光强度分别为117.96±4.11和119.77±5.19）相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）。流体剪切力加载下,细胞松弛素D组细胞c-fos基因mRNA和蛋白的表达均低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论细胞松弛素D对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白的表达起拮抗作用。保持细胞骨架的完整性是流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因表达过程中的重要条件。