转录因子特异蛋白1在头颈部鳞状细胞癌中参与微RNA-92b转录调节的研究

摘要

目的研究转录因子特异蛋白1（specificity protein 1,SP1）对头颈部鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC）细胞增殖、转移和侵袭的影响,以及SP1对微RNA（microRNA,miRNA）-92b的转录调节作用。方法实验分为转染SP1干扰小RNA（small interfering RNA,siRNA）的实验组、转染阴性对照siRNA的阴性对照组和未做处理的空白对照组。应用生物信息学方法预测miRNA-92b的转录因子。采用染色质免疫共沉淀技术验证转录因子SP1与miRNA-92b基因启动子的结合位点。转染siRNA抑制SP1表达后,用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qPCR）检测SP1和miRNA-92b的表达变化。转染后进行细胞增殖实验、Transwell迁移和侵袭实验。结果染色质免疫共沉淀技术表明miRNA-92b启动子区域有3个DNA片段位点与SP1结合。qPCR结果显示,实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中的表达（分别为0.064±0.020和0.639±0.008）显著低于阴性对照组（均为1）（P＜0.05）,实验组miRNA-92b在细胞PCI-4A和PCI-37A中的表达（分别为0.215±0.033和0.497±0.104）均显著低于阴性对照组（均为1）（P＜0.05）。实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中增殖的A值均显著低于阴性对照组（P＜0.05）。实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中迁移细胞数（分别为37.0±4.6和40.7±2.1）均显著低于阴性对照组（分别为101.0±5.3和82.7±5.7）（P＜0.05）。实验组SP1在细胞PCI-4A和PC1-37A中侵袭细胞数（分别为31.3±10.8和37.0±4.6）均显著低于阴性对照组（分别为92.3±3.1和70.3±3.1）（P＜0.05）。结论 SP1是miRNA-92b的转录因子并直接参与miRN A-92b的转录调控;SP1可以促进HNSCC细胞增殖、迁移和侵袭的能力。