稻水象甲卵巢内β1-微管蛋白基因cDNA全长的克隆及定量表达分析

摘要

利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别对中国的孤雌生殖型和美国的两性生殖型稻水象甲卵巢内β1-微管蛋白基因进行了克隆,获得的cDNA全长分别为1727 bp和1730 bp,均包含1344 bp的完整开放阅读框(ORF),编码447个氨基酸,理论分子量约50 kD,等电点4.54.同源性分析表明,克隆的β1-微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在氨基酸水平上是高度同源的,相似性介于95%～100%.荧光定量PCR分析表明,β1-微管蛋白在孤雌生殖型稻水象甲卵巢内的表达量(3.14×107 copies/μL±0.66×107 copies/μL)显著高于两性生殖型稻水象甲(5.08×106 copies/μL± 0.47×106 copies/μL).推测该基因的差异表达对于稻水象甲孤雌生殖过程中纺锤体的组装具有重要意义.