透明质酸定向诱导骨髓间充质干细胞治疗兔骨关节炎模型的实验研究

摘要

目的探讨透明质酸定向诱导骨髓MSCs分化修复兔OA模型软骨缺损的作用。方法分离、纯化并扩增兔骨髓MSCs,5-溴-2’脱氧脲嘧啶核苷（BrdU）和4’6二脒基-2-苯吲哚盐酸（DAPI）标记。Muehlema法构建兔OA软骨缺损模型24只,并按照随机数字表法随机分为3组:透明质酸治疗组（Th组）、MSCs治疗组（Tm组）、透明质酸联合MSCs治疗组（Th+m组）。治疗侧膝关节分别予以相应治疗,对照侧膝关节以等量0.9%氯化钠注射液治疗,每周1次。治疗结束3周后,行单光子发射计算机断层扫描（SPECT）和正电子发射断层扫描/计算机断层扫描（PET-CT）成像。修复标本行大体形态学、组织病理学、免疫组织化学和免疫荧光等检测。采用t检验、方差分析、Newman-Student-Keul检验进行统计分析。结果①各组组织病理学Mankin评分治疗侧均低于对照侧（Th组:3.3±0.4,5.3±0.5;Tm组:3.9±0.6,5.4±0.6;Th+m组:2.2±0.3,5.3±0.7）,差异均有统计学意义（t=-4.83,-3.83,-13.50;P均＜0.05）;Th+m组治疗侧Mankin评分（2.2±0.3）显著低于Th组（3.3±0.4）和Tm组（3.9±0.6）,差异有统计学意义（P＜0.01）;②PET-CT检测18F标记的2-氟-2-脱氧-D葡萄糖(18F-FDG)放射性核素平均计数率,Th+m治疗组治疗侧（43 773±1 371）显著高于Th组（37 983±1 270）和Tm组（37 097±1 214）,差异均有统计学意义（P＜0.01）;③SPECT检测各治疗组治疗侧99Tc标记的亚甲基二膦酸盐(99Tcm-MDP)的放射性核素平均计数率,Th+m治疗组治疗侧（768±19）显著高于Th组（590±16）和Tm组（597±14）,差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论透明质酸联合MSCs移植可以有效地修复软骨缺损。