用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒

摘要

用本所实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG.在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96、120h时取出玻片,用荧光抗体染色,在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒.经观察:兔肾上皮细胞(RK)毒培养到36～48h、羊睾丸细胞(ST)毒培养到72～96h时可观察到特异性荧光,随着培养时间的延长.荧光亮度增强,胞浆内充满特异性荧光.用肝组织强毒病料触片,呈特异性荧光,对照细胞培养48h无荧光出现,证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在,从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒.