猪源抗菌肽PMAP-23的改造及其活性测定

摘要

为设计研发新型猪源抗菌肽PMAP-23,本研究参照PMAP-23的作用机理和氨基酸组成,人工设计并合成新型抗菌肽PMAP-23LR,通过药敏试验检测其体外抗菌活性,同时以感染鼠伤寒沙门菌的小鼠作为实验动物感染模型,研究抗菌肽PMAP-23LR对致病菌的体内抗菌活性.体外抑菌试验结果显示,PMAP-23LR相较于PMAP-23对猪霍乱沙门菌C78-1的最小抑菌浓度未发生变化,对金黄色葡萄球菌25923、鼠伤寒沙门菌1344、禽巴氏杆菌C48-3、产肠毒素性大肠杆菌7915的抑菌活性增强;酸碱稳定性试验结果显示,PMAP-23LR在pH2～pH12时具有100％的抗菌活性;热稳定性试验显示,PMAP-23LR在沸水中2h后仍具有抑菌活性,溶血试验结果显示PMAP-23和PMAP-23LR在2μg/mL～1 mg/mL的浓度下均不能使鸡红细胞发生溶血.在对鼠伤寒沙门菌感染小鼠的体内治疗试验中,PMAP-23LR能够减少小鼠肝脏和肺脏的病理损伤,增加了小鼠的存活率.本研究为抗菌肽PMAP-23的改造及应用提供了参考依据.