丝状支原体丝状亚种SC生物型PCR检测方法的建议

摘要

建立了一个可以识别丝状支原体丝状亚种SC生物型(MmmSC)的PCR方法.根据丝状支原体丝状亚种SC生物型(MmmSC)相关核苷酸序列,设计合成了MC1、MC2和SC1、SC2两对引物.MC1、MC2是一对簇特异性引物,用于鉴别丝状支原体族6个成员,对MmmSC、MmmLC扩增出与预期结果相符的462bp片段;而SC1、SC2是针对MmumSC的一对特异性引物,只能对MmmSC扩增出277bp的片段,经过VspI、Bsp1431和Dral三种限制性内切酶鉴定与预期结果相符,而不能扩增出MmumLC型Y-goat代表株,说明具有非常好的特异性.对MmmSC进行的敏感性试验显示SC1、SC2引物能够检测到100个CFU,具有非常高的敏感性.