鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其原位杂交的应用

摘要

用限制酶HindⅢ和Ecorl双切鸡包涵体肝炎六邻体蛋白基因片段重组质粒,得到大小636 bp的基因片段,用地高辛标记制备DNA探针,其灵敏度为0.1～0.3 ng/μL.用该探针对感染鸡包涵体肝炎病毒的雏鸡肝组织进行原位杂交,结果表明病毒经口感染后12 h肝细胞内出现病毒的复制,3～7 d时病毒复制明显,9～16 d病毒复制减弱.原位杂交表明鸡包涵体肝炎病毒主要定位于核内,同时也可进入胞浆中.地高辛标记鸡包涵体肝炎病毒DNA探针对检测该病毒DNA的灵敏度高,特异性强,操作方便,该探针可用于本病的分子病理学研究和特异性诊断.