流行性乙型脑炎病毒一步法RT-LAMP检测方法的建立

摘要

为建立一种简便、快速、灵敏、特异的乙型脑炎病毒(JEV)检测方法,本研究根据GenBank中登录的25株流行性JEV基因组序列,设计3对特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应体系,建立了一步法反转录-LAMP(RT-LAMP)检测方法.该方法检测时间短,灵敏度比常规RT-PCR方法高,可检测出103 TCID50/0.2 mL JEV;特异性强,对猪细小病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病毒、猪瘟病毒等常见猪病毒均无交叉反应.结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBRGreen Ⅰ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化.该方法简便快捷,省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确检测流行性JEV的方法.