非洲猪瘟病毒P30蛋白在昆虫细胞中的表达

摘要

为表达非洲猪瘟病毒(ASFV) P30蛋白,本研究采用PCR方法扩增ASFV p30基因,并克隆至pOET-1载体中构建重组质粒pOET-P30,将其与flshBAC DNA共转染Sf9昆虫细胞,制备了表达P30蛋白的重组杆状病毒,并通过SDS-PAGE和western blot对重组杆状病毒进行鉴定.结果显示,表达的重组蛋白约为30 ku,能够与His标签单克隆抗体和ASF阳性血清发生特异性反应.以纯化的重组P30蛋白包被ELISA板对相关抗体进行检测,结果显示该重组蛋白仅与ASFV阳性血清发生反应,而与其他疫病阳性血清均无交叉反应,该抗原具有良好的反应原性.该蛋白的表达为ASF血清学检测方法的建立奠定了基础.