流感病毒NP蛋白与宿主蛋白CAP1相互作用的研究

摘要

流感病毒核衣壳蛋白(NP)是病毒核糖核蛋白复合体(vRNP)的主要组成部分,主要调控病毒基因组的转录和复制.为筛选与流感病毒NP相互作用的宿主蛋白,本研究采用酵母双杂交技术(Y2H)在A549细胞cDNA文库中筛选到与其相互作用的宿主蛋白Adenylate cyclase-associated protein 1 (CAP1),并通过酵母回交验证、免疫共沉淀技术(Co-IP)和GST pull down试验进一步证实NP与CAP1之间存在特异性的直接相互作用.此外,利用激光共聚焦试验证实NP与CAP1共定位于A549细胞的细胞质内.在HEK293T细胞中过表达CAP1蛋白后,流感病毒的复制能力下降,表明CAP1对流感病毒复制具有抑制作用.本研究对该蛋白的鉴定为流感病毒的复制机理研究奠定了基础.