O型与A型口蹄疫重组标记疫苗病毒株的制备及鉴定

摘要

为研制针对我国边境地区(尤其是西南边境)流行的A型口蹄疫(FMD)的标记疫苗储备病毒株,本研究通过化学合成东南亚地区流行的A型口蹄疫疫毒(FMDV)A/VN/03/2009株的P1基因,将其插入舍FMDV编码非结构蛋白3A aa91-aal05位缺失的O/HN/93病毒全长重组质粒pOFS/3A91-105中,构建FMDV A型和O型嵌合的全长重组质粒pO/3A91.105-AP1.该重组质粒经Not I酶切线性化后转染于表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞中,拯救得到FMDV重组病毒.间接免疫荧光、RT-PCR和序列测定结果表明拯救的FMDV为正确的A型和O型间嵌合及3A aa91-aal05缺失的重组病毒.病毒蚀斑和一步生长曲线表明拯救病毒的感染性和复制能力稍低于其亲本病毒.该型间嵌合标记病毒的成功拯救为研制防控边境地区A型FMD的储备疫苗奠定了基础.