外源性p53基因对人卵巢癌细胞的生物学行为及化疗放疗敏感性的影响

摘要

@@ p53基因是至今发现与人类恶性肿瘤相关性最高的基因, 约50%的人类恶性肿瘤中存在p53基因的异常[1].近年还发现p53功能异常与肿瘤对化疗、放疗的不敏感有关[2,3].因此在基因治疗的研究中p53基因的地位十分突出.卵巢肿瘤是妇科常见的恶性肿瘤,难于早期诊断,死亡率高.已发现45%～80%的卵巢肿瘤伴有p53基因的异常[4,5].因此我们构建了人野生型p53基因的真核细胞表达载体并转染人卵巢癌SKOV-3细胞,观察其对卵巢癌细胞的生物学行为及化疗、放疗敏感性的影响.rn1 资料与方法rn1.1 一般资料rn1.1.1 酶及主要试剂限制性内切酶及T4连接酶购于美国Promega公司.G418(geneticin)及脂质体(lipofectin)购于美国GIBCO公司.p53单克隆抗体(DO-1)及辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗购于北京中山生物技术公司.rn1.1.2 基因、载体和受体菌质粒pGEX-p53含有人野生型p53cDNA由起始至终止密码的序列.真核表达载体pcDNA3为本室所有,受体菌为DH5α.