姜黄素类似物促神经分化活性及其作用机制

摘要

目的对姜黄素类似物进行促神经分化活性筛选,发现活性最佳的化合物后进行分子作用机制研究。方法利用Neuro-2a细胞进行药物毒性和促神经分化活性筛选,用MTT法进行细胞毒性实验;药物诱导Neuro-2a分化后,采用神经突起专一性抗体β-tubulinⅢ进行免疫荧光染色,拍照后用ImageJ软件对细胞分化率和神经突的长度进行测量,进行统计分析。用Western印迹法对活性最佳化合物激活的分子信号通路关键蛋白进行检测,并用药理学抑制剂进行验证。结果通过对12个姜黄素类似物的促神经分化活性筛选,其中双去氧基姜黄素具有较好的促神经分化活性,在很低的浓度就能够促进Neuro-2a细胞分化,1,2和4μmol·L-1均能够促进细胞分化率和神经突起长度显著增加,并且成浓度依赖性。随后采用4μmol·L-1进行分子作用机制研究,发现双去氧基姜黄素通过激活ERK/MEK和PI3K/AKT通路诱导Neuro-2a细胞分化,并且用抑制剂U0126和LY200942得到验证。结论双去氧基姜黄素具有较好的促神经分化活性,对治疗神经退行性疾病具有潜在的研究价值。