MAL基因的表观遗传学调控对NSCLC吉非替尼敏感性的影响

摘要

目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中T细胞分化蛋白(MAL)表达水平与吉非替尼(Gefitinib,Gef)敏感性的关系,并研究MAL基因的表观遗传学调控及其对Gef敏感性的影响。方法 MTT法检测Gef对不同NSCLC细胞的增殖抑制作用;RT-PCR及Western blotting检测细胞中MAL m RNA和蛋白表达水平;MSP检测细胞中MAL基因转录起始区域甲基化状态;探究表观遗传学药物地西他滨(decitabine,DAC)、伏立诺他(vorinostat,SAHA)预处理对MAL基因表达和Gef敏感性的影响。结果与Gef敏感细胞相比,耐药细胞中MAL m RNA及蛋白水平下调或缺失(P<0.05,P<0.01),提示MAL可能与细胞对Gef敏感性有关;耐药细胞中MAL基因转录起始区域呈现高甲基化,可能是MAL表达下调的主要原因;DAC处理可明显逆转MAL基因的高甲基化,恢复MAL m RNA表达,与SAHA联用后其促进作用更为明显;恢复MAL表达的耐药细胞对Gef敏感性显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论对Gef耐药的NSCLC细胞中MAL表达下调或缺失,转录起始区域高甲基化可能是其主要原因;逆转MAL高甲基化状态、恢复其表达可增加耐药细胞对Gef的敏感性。