四君子汤改善吲哚美辛所致大鼠小肠黏膜损伤及其可能的作用机制

摘要

目的 探讨四君子汤改善小肠黏膜损伤的作用机制.方法 制备四君子汤水提物(SJZDA),通过醇沉和Severge法去蛋白得到四君子汤多糖(SJZDP);高效液相色谱法(HPLC)检测SJZDP样品图谱,苯酚-硫酸法测定SJZDP糖含量.SD雄性大鼠分组为正常对照、模型对照、模型+SJZDA 5和15 g·kg-1及模型+SJZDP 0.358和1.074 g·kg-1组.大鼠造模前1 h,模型+SJZDA和模型+SJZDP组分别ig给予相应剂量SJZDA和SJZDP,正常对照组和模型对照组给予等体积纯水;1 h后除正常对照组外,各组大鼠均皮下注射吲哚美辛6 mg·kg-1.SJZDA和SJZDP及吲哚美辛均每天给药1次,共6 d.末次给药后24 h麻醉大鼠,取腹主动脉血制备血浆;摘除小肠观察小肠黏膜大体损伤并评分;在黏膜损伤明显处取2～3 cm小肠常规石蜡包埋切片,HE染色观察组织病理变化;余小肠冰上刮取黏膜组织,制备组织匀浆.柱前衍生HPLC法检测小肠黏膜组织中多胺含量,邻甲酚酞络合酮比色法检测小肠黏膜组织Ca2+含量,Amplite荧光法检测血浆D-乳酸含量,免疫组织化学法检测小肠黏膜组织闭锁小带蛋白、闭合蛋白、封闭蛋白3、E钙黏蛋白、α连环蛋白和β连环蛋白表达.结果 HPLC图谱显示SJZDP为杂多糖,苯酚-硫酸法测得其多糖含量为81.6％.与正常对照组比较,模型对照组大鼠小肠黏膜损伤大体和组织病理评分均明显增加(P<0.01),提示小肠黏膜损伤模型制备成功.与模型对照组比较,模型+SJZDA 15 g·kg-1、模型+SJZDP 0.358和1.074 g·kg-1组大鼠小肠黏膜损伤大体和组织病理评分降低(P<0.05,P<0.01),小肠黏膜组织多胺含量提高(P<0.05,P<0.01);模型+SJZDA 15 g·kg-1和模型+SJZDP 1.074 g·kg-1组黏膜组织Ca2+含量升高(P<0.05),血浆中D-乳酸浓度降低(P<0.05,P<0.01).免疫组织化学法检测结果表明,与模型对照组比较,模型+SJZDA 15 g·kg-1和模型+SJZDP 1.074 g·kg-1组黏膜组织中闭锁小带蛋白、封闭蛋白、E钙黏蛋白、α连环蛋白和β连环蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),模型+SJZDP 0.358和1.074 g·kg-1组黏膜组织中闭合蛋白表达水平升高(P<0.01).结论 四君子汤对吲哚美辛所致大鼠小肠黏膜损伤具有改善作用,该作用可能与其影响小肠黏膜组组多胺及其调控的黏膜屏障有关.