基于网络药理学和分子对接技术探讨藏药西藏猫乳抗类风湿性关节炎作用机制

摘要

目的 通过网络药理学和分子对接技术,探索藏药西藏猫乳治疗类风湿性关节炎(RA)"多成分-多靶点-多途径"的作用机制.方法 结合文献和本课题组前期研究获取西藏猫乳的化学成分,通过Swiss Target Prediction数据库查询化学成分对应靶点.通过Drug Bank和Therapeutic Target Database等数据库以"rheumatoid arthritis"为关键词搜索RA靶点;运用Cytoscape3.7.2构建"化学成分-靶点-通路"网络图,通过DAVID进行基因本体(GO)功能富集分析和KEGG通路富集分析,预测其作用机制.采用Maestro version 11.5软件,对核心化学成分与潜在作用靶点进行分子对接验证.用Griess法测定山奈素、芹菜素和鼠李柠檬素对脂多糖诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞一氧化氮(NO)释放的影响,验证其抗炎活性.结果 西藏猫乳化学成分可能作用于原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白和胰岛素样生长因子1受体等关键靶点,GO功能富集分析得到GO条目318个(P<0.05),KEGG通路富集筛选得到80条信号通路(P<0.05).以"化学成分-靶点-通路"网络图设置等级值(degree)≥14为核心化学成分,筛选出了西藏猫乳中9个主要化学成分,通过选取等级值(degree)≥22为潜在作用靶点,得到9个靶点.将上述9个主要化学成分与9个靶点分别进行分子对接,结果显示,鼠李柠檬素与雄激素受体,芹菜素与热休克蛋白90AA1和胰岛素样生长因子1受体,柚皮素与丝裂原活化蛋白激酶8、表皮生长因子受体和人源重组蛋白RELA,山奈素与原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src、Tristin和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1,槲皮素与磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1结合最稳定.山奈素、鼠李柠檬素和芹菜素对脂多糖所致RAW264.7巨噬细胞NO释放具有明显的抑制作用(P<0.05),表明该3个化合物确有抗炎作用.结论 西藏猫乳通过"多成分-多靶点-多途径"发挥抗RA作用,该作用可能与其调控炎症、免疫、内分泌等相关靶点和通路有关,可为其临床研究提供参考.