HPLC柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度

摘要

目的:建立高效液相色谱柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度.方法:用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)将A1998 C-17位上的2个羰基衍生化,形成双腙,以提高检测灵敏度.选用A1998的同系物3β-羟基雄甾-5烯-17酮己二酸酯(C6)作为内标.色谱条件:采用Agilent Zorbax Extend C18反相色谱柱(4.6 mm×150 mn,5 μm),流动相为100%甲醇,流速2.0 mL·min-1,检测波长为360 nm.结果:血样中A1998浓度在0.05～10μg·mL-1范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),最低检测浓度为0.05μg·mL-1.回收率大于80%,日内及日间精密度RSD分别为3.2%～15%和6.7%～11%.结论:本方法灵敏、准确、实用,能够满足动物药物代谢动力学研究的要求.