UPLC-MS/MS法同时测定肾康注射液中7个有效成分

摘要

目的:建立一种UPLC-MS/MS法同时测定肾康注射液中7种成分(丹参素、羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、大黄酸、丹参酮Ⅱ_A、大黄素)的含量。方法:采用Phenomenex Kinetex XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.6μm),以甲醇(A)-0.05%甲酸水(B)溶液为流动相进行梯度洗脱(0-3 min,8%A→65%A;3~5 min,65%A→85%A)流速0.3mL·min^(-1),柱温为30℃,进样量20μL;采用电喷雾离子源进行负离子模式监测,多反应监测模式(MRM)用于定量分析。结果:在5 min内,肾康注射液的7种成分(丹参素、羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、大黄酸、丹参酮Ⅱ_A、大黄素)被完全分离,峰面积与浓度有良好的线性关系,相关系数(r)均不小于0.998 9。实验精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为96.24%~101.2%。5批样品中丹参素、羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、大黄酸、丹参酮Ⅱ_A和大黄素的含量测定结果分别为12.46~16.70、8.104~10.97、0.092 6~0.115 3、23.19~29.91、9.869~11.22、1.984~2.736和0.324 0~0.372 3μg·mL^(-1)。结论:经方法学验证本方法可用于肾康注射液中丹参素、羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、大黄酸、丹参酮Ⅱ_A、大黄素的定量测定。除大黄酸和大黄素外其他5种成分均为肾康注射液中首次测定。