RNA干扰G_(α13)对人卵巢癌HO-8910PM细胞侵袭转移的影响

摘要

目的:利用小干扰RNA技术沉默G_(α13)基因的表达,探讨其对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与转移的影响。方法:以Shuttle Vector 1.0-CMV为载体,构建针对G_(α13)的shRNA重组表达质粒;转染人卵巢癌细胞HO-8910PM,利用RT-PCR和Western Blot分别检测G_(α13)基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过MTT法、Transwell小室、Matrigel胶模型、流式细胞术,观察G_(α13)被沉默后对人卵巢癌HO-8910PM細胞生长与侵袭转移的影响;放射自显影方法分析Rho GTPases活性。结果:RTPCR和Western Blot结果显示,Shuttle Vector 1.0-CMV G_(α13)B siRNA转染组G_(α13)基因的表达水平被有效抑制。与对照组相比,Shuttle Vector 1.0-CMV G_(α13)B siRNA转染组的细胞侵袭、迁移力明显下降(P<0.01),细胞被阻滞在G_0/G_1期,且膜上Rho GT Pases与GTP结合活性明显下降。结论:靶向G_(α13)的重组shRNA质粒能够有效抑制G_(α13)基因在HO-8910PM细胞中的表达,并能降低HO-8910PM细胞侵袭迁移的能力,其机制可能与降低细胞膜上Rho GTPases活性有关,可为卵巢癌的靶向治疗提供参考。