微小RNA-142-3p靶向Rictor诱导动脉粥样硬化相关的内皮细胞凋亡

摘要

目的:探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程中人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影响及作用机制.方法:HAECs经氧化型低密度脂蛋白(oxi?dized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用后,采用RT-qPCR检测miR-142-3p的表达水平.Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(flow cytometry,FCM)和caspase-3活性检测试剂盒检测细胞凋亡.使用TargetScan等生物信息学软件预测miR-142-3p的潜在靶基因,双萤光素酶报告基因实验验证miR-142-3p与Rictor mRNA 3′-UTR直接靶向结合.结果:在ox-LDL诱导HAECs凋亡过程中miR-142-3p表达显著上调(P<0.05,P<0.01).过表达miR-142-3p促进HAECs凋亡,相反,抑制miR-142-3p的表达水平可以部分程度缓解ox-LDL介导的内皮细胞(endothelial cells,ECs)凋亡.进一步研究发现,Rictor为miR-142-3p的下游靶基因,沉默Rictor基因抑制了miR-142-3p抑制物(miR-142-3p inhibitor)的抗凋亡作用.Akt/eNOS信号通路参与了miR-142-3p对ECs凋亡的调控.结论:抑制miR-142-3p表达可促进靶基因Rictor表达并激活Akt/eNOS信号通路从而发挥抗凋亡的内皮保护作用.