长链非编码RNA ZFAS1/miR-150/ROCK1调控血管平滑肌细胞增殖和迁移

摘要

cqvip:目的:探讨长链非编码RNA ZFAS1是否通过调控微小RNA-150(miR-150)/ROCK1促进血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移,及其参与动脉粥样硬化发生发展的机制。方法:用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs增殖和迁移。用real-time PCR法检测VSMCs中ZFAS1的表达水平。进一步用小干扰RNA(siRNA)下调ZFAS1表达后,采用MTT和EdU法检测VSMCs的活力和增殖能力,采用Transwell法检测VSMCs的迁移能力,采用real-time PCR检测miR-150和ROCK1的表达水平,Western blot检测ROCK1蛋白的表达水平。萤光素酶报告基因实验验证RCOK1为miR-150的靶基因。最后,抑制miR-150表达,检测下调ZFAS1表达后VSMCs的增殖、迁移及ROCK1表达。结果:PDGF-BB上调VSMCs中ZFAS1的表达。下调ZFAS1表达后,VSMCs的增殖和迁移受到抑制(P<0.05),miR-150表达水平上升(P<0.05),ROCK1表达水平下降(P<0.05)。萤光素酶报告基因实验结果显示miR-150能直接靶向调控ROCK1。抑制miR-150表达后,能减弱下调ZFAS1表达导致的VSMCs增殖和迁移的抑制作用(P<0.05),上调ROCK1的表达水平(P<0.05)。结论:ZFAS1通过调控miR-150/ROCK1促进PDGF-BB诱导的VSMCs增殖和迁移。