千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨YAP/Smad3表达的影响

摘要

目的:观察千草方熏洗对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨Yes相关蛋白(YAP)和Smad3表达的影响,研究千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨的保护作用及机制.方法:32只SD大鼠随机分成4组:对照组、模型组、中药组和透明质酸(HA)组,模型组、中药组和HA组均采用改良Hulth法构建大鼠KOA模型,中药组大鼠进行千草方熏洗,HA组大鼠予以关节腔内注射HA.处理后,取各组大鼠膝关节软骨组织和血清,软骨组织进行苏木精-伊红(HE)染色和Mankin''''s评分,ELISA法检测血清中软骨寡聚基质蛋白(COMP)和Ⅱ型胶原C端肽(CTX-II)的表达量,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,免疫组化检测YAP和高迁移率族蛋白B2(HMGB2)的表达,并采用West-ern blot检测YAP、Smad3、骨成型蛋白2(BMP2)、Bax和Bcl-2的表达水平.结果:HE染色结果表明,模型组软骨细胞排列紊乱,结构不清晰;与模型组相比,中药组软骨表面更加光滑,结构较清晰,软骨基质着色较均匀.与模型组相比,中药组和HA组的Mankin''''s评分显著下降,血清CTX-II含量显著升高,COMP含量显著下降(P<0.05),软骨细胞的凋亡率显著下降(P<0.05).免疫组化和Western blot的结果表明,与模型组相比,中药组和HA组YAP、HMGB2、Smad3和Bcl-2的表达量增加,BMP2和Bax的表达量下降(P<0.05).结论:千草方熏洗能够通过YAP/Smad3信号通路缓解KOA.