金属硫蛋白抑制同型半胱氨酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖

摘要

目的: 研究金属硫蛋白(MT)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响及其作用机制.方法: 以[ 3H]-TdR掺入法测定VSMCs增殖程度, 免疫沉淀法测定VSMCs内丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性,[ 109 Cd]-血红蛋白饱和法测定MT含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,NADH氧化法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量.结果: Hcy(10 -6 -10 -4 mmol/L)呈浓度依赖性的刺激培养大鼠VSMCs [3H]-TdR掺入 , 0.1 mmol/L Hcy刺激[ 3H]-TdR掺入比对照组高4.2倍(P＜0.01).Hcy 亦呈浓度依赖性地激活VSMCs MAPK活性、增加细胞 MDA的生成和LDH的漏出(P均<0.01).单独MT孵育,对VSMCs的上述指标均无明显影响 (P＞0.05). 但MT(10 -6 -1 0 -4mol/L)呈浓度依赖性抑制100 μmol/L Hcy的促增殖效应(r=0.98,P＜ 0.01). MT 显著抑制 Hcy对VSMCs的MAPK活性、 MDA生成和LDH漏出的激活作用(均P＜0.01).以0.5 mmol/L ZnCl 2预孵育6 h后, VSM Cs MT含量比非诱导细胞高5.7 倍(P＜0.01),这种内源性MT高表达的细胞,显著抵抗H c y刺激的[3H]-TdR掺入和MAPK激活;抑制Hcy的促细胞MDA生成与LDH漏出效应(均P ＜0.01).结论:MT能有效抑制Hcy促大鼠VMSCs增殖作用,其机制可能与MT拮抗Hcy对MAPK的激活和其抗氧化作用有关.