缺氧时星形胶质细胞定量mRNA表达的内部参照标准研究

摘要

目的:观察缺氧对脑星形胶质细胞( AC)守家基因甘油醛-3-磷酸-脱氢酶(GAPDH)和β-肌动蛋白(actin)mRNA表达的影响,进一步观察内皮素转换酶(ECE)-2 mRNA可否作为该条件下的内部参照标准.方法: 从新生小鼠大脑获原代AC培养,分别在缺氧和正常氧条件下培养24 h,提取mRNA,以溴化乙啶染色的28S及18S rRNA作内部参照,用Northern blot杂交技术定量测定GAPDH、β-actin和ECE-2 mRNA水平.结果: 缺氧24 h,AC GAPDH mRNA的表达显著增加,β-actin mRNA表达明显下降;缺氧前后ECE-2的mRNA水平无明显差异.结论: 在缺氧缺血条件下,GAPDH和β-actin不宜作为AC定量mRNA分析的内部参照标准,ECE-2可作为其替代.