独特型TCR Vβ2 DNA疫苗的构建和体外表达检测

摘要

目的:构建抗淋巴细胞白血病的独特型TCR Vβ2 DNA疫苗,并检测其转染K562细胞和体外表达情况.方法:利用RT-PCR扩增表达TCR Vβ2的Molt-4细胞株的独特型TCR Vβ2基因片段,定向克隆于pIREs表达载体中,重组质粒转染至K562细胞中,利用间接免疫荧光法、SDS-PAGE和Western blotting等检测其表达情况.结果:经PCR检测证实成功构建pIREs-TCR Vβ2重组子,转染至K562细胞后,利用Vβ2单抗可检测到K562细胞表面表达TCR Vβ2,SDS-PAGE分离检测为15 kD的蛋白质,并经Vβ2特异抗体Western blotting鉴定为TCRVβ2蛋白.结论:成功构建pIREs-TCR Vβ2 DNA疫苗,并可以在K562细胞株中表达特异蛋白.