NPPB和尼弗灭酸对H2O2损伤C6胶质细胞谷氨酸半胱氨酸合成酶及CLIC4表达的影响

摘要

目的:观察氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)-苯甲酸(NPPB)、尼弗灭酸(NFA)对H2O2诱导的神经胶质瘤C6细胞损伤的影响.方法:MTT法检测NPPB、NFA、H2O2作用的c6细胞生存率;紫外分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率以及谷胱甘肽GSH水平;RT-PCR检测谷氨酸半胱氨酸合成酶(GCL)亚单位GCLC、GCLM及线粒体氯通道(CLICA)mRNA表达;Western blotting检测CLICA的蛋白水平.结果:与对照组相比,H2O2组c6细胞存活率和GSH含量明显降低;LDH释放率增加;GCLC、GCLM、CLICA mRNA表达降低;CLICA蛋白水平明显增强.NPPB或NFA与H2O2联合作用于C6细胞组,与单独应用H2O2组相比,细胞存活率和GSH含量未见明显变化;LDH释放率降低;GCLC、CCLM mRNA 表达未见明显差异;CLIC4蛋白表达下降.结论:氯通道阻断剂NPPB或NFA能够在一定程度上减轻氧化应激引起的C6细胞损伤,可能与调节细胞膜功能和下调CUC4蛋白表达有关.