达格列净通过改善线粒体功能减轻2型糖尿病小鼠及高糖诱导的血管内皮细胞损伤

摘要

目的:探讨达格列净对2型糖尿病小鼠胸主动脉内皮细胞损伤及高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的抑制作用及其分子机制。方法:(1)将20只2型糖尿病db/db小鼠随机分为模型组和达格列净组,另取10只正常db/m小鼠作为对照组。饲养40 d后麻醉处死,迅速摘取眼球取血,分离血清,并收集胸主动脉组织。HE染色观察胸主动脉组织形态学改变,Western blot法检测小鼠胸主动脉组织中ATP合酶α亚基(ATP5A1)、内皮素1(ET-1)和前列环素(PGI_(2))蛋白表达水平。(2)将HUVECs分为对照组、DMSO组、高糖组和高糖+达格列净组;采用活性氧(ROS)荧光探针和线粒体ATP荧光探针检测HUVECs中ROS及线粒体ATP荧光强度;采用免疫细胞化学和Western blot检测HUVECs中ATP5A1、ET-1和PGI_(2)蛋白表达水平。结果:达格列净可显著减轻db/db小鼠胸主动脉组织损伤;与高糖组相比,达格列净治疗后HUVECs中ROS荧光强度显著降低,线粒体ATP荧光强度显著升高(均P<0.01);免疫细胞化学和Western blot结果显示,达格列净治疗后ATP5A1和PGI_(2)蛋白表达水平显著升高,ET-1蛋白表达水平显著降低(均P<0.01);ATP5A1过表达质粒转染后,HUVECs中ATP5A1和PGI_(2)蛋白表达水平显著升高,ET-1表达水平显著降低(均P<0.01)。结论:达格列净减轻2型糖尿病小鼠胸主动脉内皮细胞损伤及高糖诱导的HUVECs损伤,其机制可能与调控ATP5A1表达、改善线粒体功能有关。