恶性疟原虫疫苗研究Ⅵ．多价保护性抗原的免疫原性

摘要

利用工程菌ＰＷＲ－１／ＪＭ１０９以融合蛋白的形式表达人工合成的恶性疟重组基因ｐｆＣＭＲ。经培养、ＩＰＴＧ诱导后收集菌体、超声波破菌、透析、电泳纯化等步骤，分离表达蛋白。结果在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中显示６５ｋＤ蛋白诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的体液免疫和细胞免疫反应进行了观察。结果表明，纯化后的蛋白免疫鼠血清能与表达产物粗提物产生特异的免疫反应，其抗体滴度高达１∶５１０２；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ在６５ｋＤ处亦产生特异免疫反应；另在体外用ＰＨＡ和粗提物以及纯化蛋白刺激免疫鼠脾细胞，其Ｔ淋巴细胞转化率分别高达４４．２０±５．２６％、２４．００±４．７４％和３３．５０±３．８４％。提示融合蛋白中含有恶性疟原虫抗原Ｔ－／Ｂ－细胞位点。