水杨酸长期注射对老年性耳聋的防护作用

摘要

目的 本研究通过应用多种剂量的水杨酸长期慢性注射方法,来防治年龄相关老年性聋DBA/2J小鼠的听力损失,拟选择有效的水杨酸剂量,达到防治老年性聋的目的.方法 选用快速老化的年龄相关老年性聋DBA/2J小鼠,各组随机选取10只小鼠,从4周龄开始用100、150、200和250mg/Kg的水杨酸腹腔连续注射30天,对照组用同剂量的生理盐水注射,在试验前和治疗后测定动物的ABR反应阈值.在治疗30天后,动物麻醉处死,3只动物耳蜗分离取出,耳蜗行全基底膜免疫组化prestin表达标记;3只动物行扫描电镜观察和硝酸银染色全耳蜗铺片毛细胞计数观察;另3只动物行耳蜗蛋白提取Western Blotting蛋白印痕测定和全耳蜗RNA提取RT-PCR测定.结果 水杨酸长期慢性注射治疗30天后,200mg治疗组的效果最好,ABR反应阈值较治疗前没有差异,而其它各组的ABR反应阈值较治疗前均有上升,其ABR反应阈值治疗前与治疗后的差值依次分别为:200mg治疗组-0.37dB?SPL,100mg治疗组11.15dBSPL,250mg治疗组12.68dBSPL,150mg治疗组16.72dBSPL.全耳蜗毛细胞计数结果为:200mg治疗组的毛细胞存活百分率最好,表现为耳蜗顶回基本存活,中回大部分毛细胞存活,基底部仍有少量毛细胞存活.其次为100mg治疗组,而150mg和250mg治疗组较差,毛细胞损失最严重的是盐水对照组.各组的ABR反应阈值与毛细胞计数结果基本一致.耳蜗基底膜行免疫组化prestin表达标记可见,200mg治疗组的prestin表达荧光最强,其次是100mg治疗组,150mg治疗组较弱,而250mg治疗组和盐水组更弱.Western Blotting蛋白印痕测定和全耳蜗RNA提取RT-PCR测定亦证明同样的结果.结论 本研究证明200mg的水杨酸长期慢性注射可以有效的防治老年性聋的发展进程,合适剂量的水杨酸可以上调耳蜗毛细胞prestin的表达,达到补偿因老年退化导致的prestin表达下降,使耳蜗毛细胞的损失减少,听功能减退明显减缓,但要彻底阻止老年性聋的发展,尚需联合其它方法进行更广泛和深入的研究.