外源性TGF-β1及IGF-1诱导大鼠脂肪干细胞向软骨细胞分化的实验研究

摘要

目的 探讨大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的分离、培养、扩增方法及单层培养条件下外源性转化生长因子TGF-β1和胰岛素样生长因子IGF-1诱导ADSCs向软骨细胞定向分化的可能性及两者的协同作用分析.方法 取大鼠大网膜及肾周脂肪囊等处脂肪组织,酶消化法分离培养脂肪干细胞;免疫荧光测定CD29和CD44抗原的表达;分别用4组诱导培养基定向软骨方向诱导;诱导2周后细胞爬片行免疫荧光鉴定CollagenⅡ表达;RT-PCR、Western blot对定向诱导后的细胞的表达进行检测.结果 自大鼠脂肪组织中可分离出脂肪干细胞,体外生长形态类似成纤维细胞,可长期增殖,CD29和CD44抗原表达阳性,定向诱导后IGF-1组、TGF-β1组及TGF-β1+IGF-1组细胞可表现出软骨细胞的特性,TGF-β1和IGF-1共同作用组软骨特异性基质的分泌明显高于单独诱导组.结论 从大鼠脂肪组织中可分离出脂肪干细胞,生物学特性稳定,TGF-β1和IGF-1均能定向诱导ADSCs向软骨方向分化,两者共同诱导时具有协同作用.