加味青娥丸对糖皮质激素诱导骨质疏松小鼠骨组织外泌体miRNA表达谱的影响

摘要

目的探讨青娥丸加味(Modified Qing’E Formula,MQEF)对激素性骨质疏松(glucocorticoid induced osteoporosis,GIOP)小鼠骨髓液外泌体miRNA表达的影响。方法选取48只SPF级C57BL/6雄性小鼠,随机选取6只作为正常对照组,其余42只造成GIOP模型,随机抽取6只采用Micro-CT检测模型。其他造模成功后小鼠随机分为模型组及MQEF治疗组,每组18只。治疗3个月后,两组小鼠分离出骨髓组织外泌体中miRNA,使用DNBSEQ平台测序,通过对数据过滤及质控得到高质量数据,对得到的miRNA进行差异性分析以及表达差异排序。测序完成后,通过qRT-PCR对测序所得miRNA进行验证。结果在MQEF组和模型组小鼠骨髓液外泌体中获得miRNA 1734个,差异性表达的miRNA22个:上调表达18个,下调表达4个;已知miRNA 18个,新miRNA 4个。最显著变化为miR-122-5p,qPCR验证结果显示miR-122-5p在MQEF组上调4.5倍,差异有统计学意义(P<0.05)。MQEF广泛靶向代谢组学定量分析显示其活性成分主要包括黄酮及类黄酮化合物,其中甘草黄酮、异补骨脂素及夏佛塔苷为MQEF中排名前三的化合物。结论GIOP小鼠骨髓组织外泌体中miR-122-5p在MQEF干预治疗病理进程中可能发挥重要作用,MQEF活性成分甘草黄酮及异补骨脂素可能在其中发挥重要作用。