抗γ公共链单克隆抗体诱导治疗延长小鼠移植心脏存活时间及其机理

摘要

目的探讨以抗γ公共链（γc链）单克隆抗体特异性阻断同种反应性T淋巴细胞的信号通路对心脏移植物存活的影响,并探讨相关机制。方法分离Balb/c小鼠和C57BL/6小鼠的脾细胞,荧光染色后进行混合培养,分别于培养时（实验Ⅰ组）和培养第3天时（实验Ⅱ组）在培养体系中加入抗γc链单克隆抗体,以单一细胞培养为阴性对照,混合细胞培养但不加抗γc链单克隆抗体为阳性对照,观察培养不同时间的细胞增殖和凋亡情况。另以刀豆蛋白刺激C57BL/6小鼠脾细胞,然后加入抗γc单克隆抗体作用14 h,进行膜联蛋白5染色,观察细胞凋亡情况。制作移植物抗宿主反应（GVHR）模型,静脉给予抗γc链单克隆抗体,观察肝脏内T淋巴细胞凋亡情况。以Balb/c小鼠为供者,C57BL,/6小鼠为受者,进行颈部异位心脏移植,致敏组术前静脉输注供者脾细胞悬液;干预组术前静脉输注供者脾细胞悬液,并于心脏移植前7、5、3、1 d经尾静脉注射抗γc链单克隆抗体,观察各组术后移植心脏的存活情况。结果混合淋巴细胞培养中,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组及阴性对照组细胞的荧光强度未见明显减弱;培养第3天后,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组的前G1期细胞数均较阴性、阳性对照组有所增加,其中实验Ⅰ组前G1期细胞数与阳性对照组的差异最为明显（P＜0.01）。经抗γc链单克隆抗体作用后,膜联蛋白5阳性细胞数增多,且为CD3阳性细胞。GVHR小鼠接受抗γc链单克隆抗体输注后,门静脉周围聚集的淋巴细胞出现凋亡。对照组和致敏组的移植心脏分别在术后（8.7±0.5）d和（4.3±0.5）d停跳,干预组的移植心脏存活时间达到（50.2±33.9）d,明显长于致敏组和对照组（P＜0.01）,其中1只受者的移植心脏存活时间达到114 d。结论抗γc链单克隆抗体可以显著延长小鼠移植心脏存活时间,其机理与特异性清除供者反应性T淋巴细胞有关。