人晶状体蛋白质组研究中双向电泳技术的初步建立与优化

摘要

目的:初步建立人晶状体蛋白质组研究中的双向电泳分离技术,提高晶状体蛋白分辨率和重复性.方法:采用固相pH梯度(IPG)等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向电泳技术,对样品的处理、水化、等电聚焦、SDS-PAGE等步骤进行了优化.结果:样品经3次重复实验,获得了蛋白质斑点数(133±7)个,蛋白质斑点在IEF方向平均偏差为(2.13±0.17)mm,在SD-PAGE方向平均偏差为(1.78±0.21)mm,相对百分含量的标准差为(4.01±1.64)%.结论:双向电泳适合于人晶状体蛋白质组的研究.