PKCα对人视网膜色素上皮细胞移行作用的影响

摘要

目的通过体外实验探讨蛋白激酶Cd（PKCα）对人视网膜色素上皮（RPE）细胞移行的影响。方法实验研究。培养正常人PKCα RPE细胞，将实验分为Control组、Thymeleatoxin（PKCa激动剂）组、siRNA-PKCα（PKCα抑制剂）组和Nonsilencing siRNA（Non-siRNA）组，应用RT—PCR检测RPE细胞内PKCα mRNA的表达。细胞划痕实验观察RPE细胞的移行速度，Transwell实验观察RPE细胞的跨膜细胞数，活细胞动态实验观察RPE细胞的细胞活力。组间数据比较采用独立样本t检验。结果通过光镜和免疫荧光方法计数成功培养获得RPE细胞。Thymeleatoxin组的RPE细胞内PKCα mRNA的含量明显高于Control组（t=3．712，P=-0．034），siRNA-PKCα组的PKCOtmRNA的含量明显低于Non—siRNA组（t=3．274，P=0．031）。Thymeleatoxin组RPE细胞的移行速度、跨膜细胞数、细胞活力等均明显优于Control组（t=9．743、5．616、2．300，均P〈0．05），siRNA—PKCα组的移行速度、跨膜细胞数、细胞活力等均明显弱于Non—siRNA组（t=3．643，P〈0．001；t=7．202，P=-0．002；t=2．418，P=-0．042）。结论PKCoL对人RPE细胞的移行有上调作用，提示PKCα可为增生性玻璃体视网膜病变的防治提供新的药物靶点。