血管内皮生长因子和转化生长因子-β2对人视网膜色素上皮细胞分化及其介导胶原凝胶收缩的机制研究

摘要

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）与转化生长因子（TGF）-β2对人视网膜色素上皮（RPE）细胞分化及其介导胶原凝胶收缩的机制。方法实验研究。原代培养人RPE细胞,将其与Ⅰ型胶原凝胶混合,观察细胞在胶原中的收缩情况。实验分为3组,VEGF（50μg/L）组、TGF-β2（5μg/L）组和对照组,比较3组凝胶收缩性状的变化。同时,对人RPE细胞的增殖、形态和分化演变趋势进行分析。3组检测数据的多重比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果与Ⅰ型胶原凝胶混合后,VEGF组和TGF-β2组的凝胶收缩率均表现出时间相关性,于24、48、72 h分别达到（34.7±3.1）%、（44.3±6.0）%、（44.0±7.2）%和（29.3±3.1）%、（31.7±3.5）%、（29.0±3.6）%。与对照组[（20.0±0.5）%、（17.3±3.6）%、（19.1±0.8）%]相比,各时间点凝胶收缩率差异均有统计学意义（24 h:F=26.220,P=0.001;48 h:F=26.796,P=0.001;72 h:F=21.522,P=0.002）;3组间各时间点两两比较差异亦有统计学意义（SNK-q检验,P＜0.05）。免疫印迹法检测两个实验组内各时点人RPE细胞内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平,差异均有统计学意义（TGF-β2组:F=1.134,P=0.000;各时间点:SNK-q检验,P＜0.05;VEGF组:F=279.179,P=0.000;各时间点:SNK-q检验,P＜0.05）。进一步两两比较,TGF-β2组胶原凝胶收缩效应较VEGF组显著（6 h:F=3.646,P=0.000;24 h:F=18.706,P=0.003;48 h:F=124.195,P=0.000;72 h:F=76.811,P=0.000）。倒置显微镜与激光扫描共焦显微镜下观察可见,TGβ2组和VEGF组人RPE细胞形态均发生了成纤维细胞样转化。结论 VEGF和TGFβ2均可诱导人RPE细胞发生成纤维细胞样转化,从而引起胶原凝胶的收缩性状改变,这可能是玻璃体视网膜界面性疾病发生、发展的机制之